清远病毒灭活测试标准

病毒灭活检测病毒是一种可以在其它生物体间传播并感染生物体的微小生物（其实因为病毒本身不能进行新陈代谢，所以某种程度上还不能说病毒是生物）。有时使用“病毒”描述那些在真核生物中传播和感染的生物；使用“噬菌体”或“吞噬体”来描述那些在原核生物间传播的生物。
病毒灭活是指用物理或化学手段杀死病毒，但是不损害它们体内有用抗原的方法。灭活病毒，会使病容毒蛋白的结构受到破坏，蛋白不再有生理活性，所以失去感染，致病和繁殖能力，但是常规的灭活不影响病毒蛋白的一级结构，意思就是病毒蛋白的序列没有变化。*系统对抗原的识别分成两种，一种是构像表位，一种是线性表位。构象表位意思就是蛋白的三维结构，而线性表位就是蛋白的序列一级结构。T细胞只需要识别线性表位就成接受*呈递细胞给出的信号，引发*反应。所以灭活的病毒具有抗原性，但失去感染力。这个其实是很多疫苗的制造原理。灭活的病毒失去感染活性，但仍有融合活性。用于动物细胞工程中的细胞融合的诱导剂。

病毒培育与灭活实验：
1、实验材料：
实验用病毒株，宿主细胞，细胞培养瓶与 96 孔培养板，恒温水 浴箱，二氧化碳培养箱，层流**净工作台，-80℃低温箱，二氧化碳培养箱，液氮，离心设备，移液器，细胞维持培养基，细胞完全培养基，去离子水等。
2、实验过程：
病毒悬液制备：实验组，阳性对照组，阴性对照组。病毒培育需每日观察细胞与宿主细胞生长情况，接种细胞，病变收获病毒， 每组按照特定条件设置病毒灭杀实验验证，并每组进行噬斑病毒感染滴度测定。平均灭活对数值计算，评价。

病毒灭活试验病毒悬液的制备：
1、从液氮中取出冻存的试验用宿主细胞，在37°C温水中*融化，用毛细吸管移植于含有细胞维持液的细胞管内，吹吸数次，使混匀,立即离心(3000r/min， 3min) ，去上清液。再加入适当的细胞维持液，吹吸数次，使混匀，同上离心后，转种于加有10完全培养基的培养瓶中。逐日观察细胞生长情况，在细胞长满单层时，用于消毒试验。
2、取出低温冻存的试验病毒毒种，37°C水浴融化，用细胞维持液作10倍稀释，然后接种于已经长满单层细胞的细胞瓶内，置37°C温箱中，使与细胞吸附、生长。逐日观察病变，待3/4细胞出现病变时，收获病毒。
3、将含有病毒及宿主细胞的培养液，在冰浴条件下，用超声波(或反复冻融)破碎宿主细胞，释放病毒。然后，尽快离心(6000r/min,15min)去除沉淀(主要为细胞碎片)，上清液即为所需的病毒悬液。按每管1. 0分装于无菌离心管(1.5)中。
4、取1支病毒悬液，按病毒滴度测定法，测定其病毒滴度。其余均冷冻保存于-80°C备用。

消毒产品病毒杀灭试验：
国家卫生计生委要求类、第二类消毒产品上市前需要自行或者委托第三方进行卫生安全评价，评价合格的消毒产品方可上市销售。卫生安全评价项目包括：消毒剂检验项目、消毒器械检验项目、指示物检验项目、灭菌物品包装物检验项目、抗(抑)菌制剂检验项目。为客户提供技术检测服务，强大技术支持加周期优势，为客户产品上市提供**。
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